《共識(shí)》還明確到對(duì)于HPV檢測(cè)來(lái)說(shuō)，要求其有高度的臨床靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值，并且在保證較高檢出率的同時(shí)，盡量降低假陽(yáng)性率。
PlexTaq® 5x-qPCR Multiplex Master Mix即用型預(yù)混液，為HPV分子診斷的應(yīng)用提供了強(qiáng)大的多重qPCR解決方案，包括快速、特異、可凍干、強(qiáng)耐抑制和穩(wěn)定性等。
? 獨(dú)特的適配體修飾酶，更快速；
? 多重qPCR檢測(cè)，更均一；
? 即用型可凍干，更便捷；
? 強(qiáng)耐受能力，更高效；
? 室溫不影響酶活，更穩(wěn)定。
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貨號(hào) |
產(chǎn)品描述 |
包裝規(guī)格 |
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PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix |
100/500 reactions |
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Taq Hotstart DNA Polymerase |
400/4000 U |
為實(shí)現(xiàn)在PCR反應(yīng)中具有更高特異性的熱啟動(dòng)DNA聚合酶，我們生產(chǎn)了一種僅在最佳循環(huán)溫度下激活的酶突變體，并設(shè)計(jì)了一個(gè)獨(dú)特的適配體序列與酶活性位點(diǎn)結(jié)合，以熱可逆的方式阻斷/激活酶活性，更快速啟動(dòng)酶活，縮短PCR運(yùn)行時(shí)間。
圖1.通過(guò)適配體與聚合酶結(jié)合使酶在較低溫度下失活，高于55°C的溫度適配體脫落從而釋放酶活性。
獨(dú)特的DNA聚合酶為多重qPCR反應(yīng)提供了高靈敏度和特異性能，PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix 5倍濃度即用型預(yù)混液，為多重檢測(cè)需求提供更多優(yōu)化空間，并且于一個(gè)反應(yīng)中成功實(shí)現(xiàn)多達(dá)30重的DNA擴(kuò)增。
分子診斷中使用凍干型檢測(cè)試劑的益處包括室溫運(yùn)輸、儲(chǔ)存、保質(zhì)期延長(zhǎng)和更加靈活的加樣分析等。PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix即用型預(yù)混液配方，經(jīng)優(yōu)化并包含凍干所需組分 (如賦形劑、酶保護(hù)劑等)，可直接支持后續(xù)凍干需求。凍干前后的性能穩(wěn)定，為有凍干需求的應(yīng)用提供更加高效、便捷的解決方案。
圖3.PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix凍干前后的性能比較
獨(dú)特的DNA聚合酶對(duì)常見(jiàn)的PCR抑制劑表現(xiàn)出很強(qiáng)的耐受性，我們驗(yàn)證了PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix 以血液為樣本的耐受能力表現(xiàn)，反映出其對(duì)于復(fù)雜類型樣本的強(qiáng)耐受能力 (圖4)，可以通過(guò)粗樣本直接進(jìn)行檢測(cè)，無(wú)需核酸提取純化步驟，極大程度上節(jié)省了時(shí)間及成本。
圖4. PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix強(qiáng)耐受能力表現(xiàn)
(分別采用三種抗凝劑 (K3 EDTA、肝素鈉和檸檬酸鹽) 將血液樣本稀釋成不同濃度 (0.1%-20%)，以ACTB1基因?yàn)榘悬c(diǎn)進(jìn)行qPCR反應(yīng))
Medix Biochemica獨(dú)特的工程Taq DNA聚合酶變體，用于PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix即用型預(yù)混液中，在室溫下非常穩(wěn)定。與其他常規(guī)Taq DNA聚合酶同時(shí)在21°C條件下過(guò)夜后進(jìn)行反應(yīng)測(cè)試，其反應(yīng)信號(hào)強(qiáng)度及靈敏度均未受影響 (圖5)。
圖5. Medix Biochemica Taq Hotstart DNA聚合酶和其他供應(yīng)商Taq DNA聚合酶的常溫穩(wěn)定性表現(xiàn)對(duì)比
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