Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix單支即用型預(yù)混液，其核心的工程化聚合酶兼具反轉(zhuǎn)錄活性，具有極高的耐熱性及穩(wěn)定性，可用于無論是 DNA 還是 RNA 樣本的 (RT)-qPCR 檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)一步到位 RT-qPCR，使臨床分子檢測(cè)更加省時(shí)、省力、省成本！
可實(shí)現(xiàn)零步法 RT-qPCR (無需單獨(dú)反轉(zhuǎn)錄步驟)，更快獲得檢測(cè)結(jié)果。
對(duì)于 RNA 樣本的檢測(cè)，無需單獨(dú)反轉(zhuǎn)錄步驟，直接高溫變性開始進(jìn)入 (RT)-qPCR 循環(huán)過程，極大程度縮短了反應(yīng)總時(shí)長(zhǎng)，更快獲得檢測(cè)結(jié)果，助力分子診斷快速檢測(cè)。
圖1. 傳統(tǒng)一步法 RT-qPCR 和應(yīng)用 Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix 的快速零步法 RT-qPCR 的對(duì)比
全預(yù)混型 Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix，僅提供單支預(yù)混液，無論對(duì)于 DNA 還是 RNA 類型模板，僅需一步添加引物/探針和樣本，即可完成 DNA 或 RNA 模板的擴(kuò)增檢測(cè)，助力加樣檢測(cè)省時(shí)、省力！
Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix 其核心的雙功能酶，兼具反轉(zhuǎn)錄活性的工程化聚合酶，其雙功能活性無需使用錳離子的激活，即可同時(shí)讀取 DNA 和/或 RNA 模板，對(duì)于各類反應(yīng)體系兼容性更高，一酶即可解決各類型樣本。
圖2. Volcano3G® 核心雙功能酶，可適用于 DNA 和/或 RNA 模板的擴(kuò)增及檢測(cè)
— Volcano3G® 核心雙功能酶，可擴(kuò)增并檢測(cè) DNA 模板
— Volcano3G® 核心雙功能酶，可擴(kuò)增并檢測(cè) RNA 模板
-- 普通 Taq 聚合酶，可擴(kuò)增并檢測(cè) DNA 模板
-- 普通 Taq 聚合酶，無法擴(kuò)增并檢測(cè) RNA 模板
引用文獻(xiàn)：Johannes W. P. Kuiper, Timo Baade, et al. Detection of SARS-CoV-2 from raw patient samples by coupled high temperature reverse transcription and amplification. PLoS One. 2020 Nov 2;15(11):e0241740.
Volcano3G® 可達(dá)到 95℃ 半衰期 >40min，具有極高的耐熱性。以 RNA 類樣本為例，在 45~95℃ 溫度范圍依然保持高效的 RNA 反轉(zhuǎn)錄和 DNA 擴(kuò)增效率。在 RT-qPCR 過程中，較高的反轉(zhuǎn)錄溫度有助于減少靶基因中形成的 RNA 二級(jí)結(jié)構(gòu)，提高檢測(cè)特異性及靈敏度，整體提升反應(yīng)性能。
圖3. Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix (#6101) 高達(dá) 95°C 熱穩(wěn)定性
實(shí)驗(yàn)組：Volcano3G®、供應(yīng)商 B 試劑、供應(yīng)商 C 試劑，于 45~95℃ 加熱 15min 后，用于 SARS-Cov-2 為樣本的 RT-qPCR 檢測(cè)，得到實(shí)驗(yàn)組 Cq 值。
對(duì)照組：Volcano3G®、供應(yīng)商 B 試劑、供應(yīng)商 C 試劑，用于 SARS-Cov-2 為樣本的 RT-qPCR 檢測(cè)，得到對(duì)照組 Cq 值。
Cq (對(duì)照組) - Cq (實(shí)驗(yàn)組)=ΔCq，增加的 ΔCq 值則表明在恒定模板量前提下發(fā)生延遲或沒有擴(kuò)增。
供應(yīng)商 B、C 經(jīng)過高溫處理后，增加的 ΔCq 表明在恒定模板量前提下發(fā)生延遲或沒有擴(kuò)增，而 Volcano3G® 經(jīng)過高溫后依然保持高效酶活性，具有更優(yōu)的熱穩(wěn)定性。
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