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ApoE基因分型檢測(cè)應(yīng)用及解決方案

ApoE基因編碼載脂蛋白E (Apolipoprotein E) 參與體內(nèi)脂質(zhì)代謝、免疫調(diào)節(jié)和神經(jīng)生理過(guò)程等功能。ApoE基因包含三種亞型,分別是ApoE2、ApoE3和ApoE4,并且該基因具有兩個(gè)關(guān)鍵的SNP,即rs429358和rs7412,構(gòu)成六種基因型。不同的ApoE基因亞型與不同疾病之間存在一定的關(guān)聯(lián),也為臨床診斷提供更廣闊的思路與方向。

 

01

阿爾茨海默病 (AD) 的預(yù)防及輔助診斷

對(duì)于ApoE基因分型的檢測(cè),可用于阿爾茨海默病發(fā)生與轉(zhuǎn)化風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè),其中ApoE4是阿爾茨海默病癥的高風(fēng)險(xiǎn)基因。攜帶1個(gè)ApoE ε4者發(fā)生AD的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加約3~4倍,攜帶2個(gè)ApoE ε4者發(fā)生AD的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加約10~15倍。

02

心腦血管疾病的預(yù)防及輔助診斷

ApoE基因與膽固醇代謝和心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)有關(guān),攜帶ApoE ε2和ApoE ε4可能對(duì)心臟病和中風(fēng)有不同程度的風(fēng)險(xiǎn),其同時(shí)也是動(dòng)脈粥樣硬化的風(fēng)險(xiǎn)基因。

03

他汀類藥物的用藥指導(dǎo)

他汀類藥物是應(yīng)用最廣泛的降脂藥,患者在服用他汀類藥物時(shí),其臨床療效與不良反應(yīng)存在較大的個(gè)體差異。

ApoE基因在一定程度上會(huì)影響他汀類藥物的降脂療效,比如對(duì)于攜帶ApoE ε4的患者,他汀類藥物的降脂效果可能較差。因此,根據(jù)ApoE基因型制定個(gè)體化治療方案時(shí),需選擇更適合的他汀類藥物種類和劑量。

 

Medix Biochemica高品質(zhì)分子診斷原料,基于熒光定量PCR技術(shù),可提供針對(duì)熔解曲線、等位基因特異性PCR等方法的酶,為ApoE基因分型提供準(zhǔn)確、高效的基礎(chǔ)保障。

 

HiDi®

高效鑒別能力酶,等位基因特異性PCR金標(biāo)準(zhǔn)

 

等位基因特異性PCR,可在標(biāo)準(zhǔn)PCR條件下的單反應(yīng)中,通過(guò)在等位基因特異性引物的3’末端引入堿基錯(cuò)配,高效區(qū)分SNP。

Medix Biochemica HiDi®系列產(chǎn)品,專門(mén)針對(duì)等位基因特異性PCR應(yīng)用,具有超高效鑒別能力。對(duì)于引物3’末端僅單獨(dú)一個(gè)錯(cuò)配,即具有高特異性,且無(wú)論是轉(zhuǎn)換型或顛換型錯(cuò)配,均可高效鑒別 (圖1)。

 

圖1. HiDi® 2x PCR Master Mix與其他供應(yīng)商在ARMS-PCR應(yīng)用中的對(duì)比

 

圖A:引物設(shè)計(jì),其中 “ 野生型匹配引物;

圖B, C:HiDi® 2x PCR Master Mix對(duì)于僅3’末端單獨(dú)的轉(zhuǎn)換型或顛換型錯(cuò)配,其錯(cuò)配引物延伸均有明顯循環(huán)滯后。

 

以 100bp 長(zhǎng)度片段的肌動(dòng)蛋白 (Actin) 基因 (Genbank NM_001101.5) 為靶基因進(jìn)行擴(kuò)增,10 倍梯度稀釋人基因組為模板 (50000, 5000, 500, 50 和 5 DNA拷貝數(shù)),并分別設(shè)定 3 個(gè)復(fù)孔。

HiDi® 2x PCR Master Mix: 采用任何一種錯(cuò)配引物均可高效地完成突變位點(diǎn)的鑒別。

供應(yīng)商 A: 采用任何一種錯(cuò)配引物均無(wú)法進(jìn)行突變位點(diǎn)的鑒別。

供應(yīng)商 B: 采用任何一種錯(cuò)配引物均無(wú)法進(jìn)行突變位點(diǎn)的鑒別,并且擴(kuò)增表現(xiàn)不佳。

供應(yīng)商C: 采用任何一種錯(cuò)配引物均無(wú)法進(jìn)行突變位點(diǎn)的鑒別,擴(kuò)增表現(xiàn)不佳并且產(chǎn)生熒光信號(hào)值更低。

  • 獨(dú)特的工程化聚合酶,具有高效鑒別能力 (High Discrimination);

  • 靈敏度可至 104 個(gè)拷貝野生型基因背景中,檢測(cè)到小于 10 拷貝突變;

  • 可高效鑒別引物3’末端的單堿基轉(zhuǎn)換或顛換型錯(cuò)配。

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

#4200

HiDi® Taq 2x PCR Master Mix (探針?lè)?

#9201

HiDi® Taq DNA polymerase (探針?lè)?

#9001

HiDi® DNA polymerase (染料法)

#9101

HiDi® 2x PCR Master Mix (染料法)

 

 

 

Plextaq®

多重qPCR,強(qiáng)耐受能力、可凍干

 

獨(dú)特的DNA聚合酶為多重qPCR反應(yīng)提供了高靈敏度和特異性能,DNA 模板濃度由10,000至10拷貝/反應(yīng)進(jìn)行梯度稀釋,經(jīng)凍干后的Plextaq® 檢測(cè)靈敏度可至10拷貝/反應(yīng),并且確保了不同檢測(cè)靶標(biāo)結(jié)果的均一性 (圖2)。

 

圖2. 經(jīng)凍干后的PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix用于多重qPCR檢測(cè)

  • 5倍濃度預(yù)混液,為多重檢測(cè)需求提供更多優(yōu)化空間;

  • 穩(wěn)定且高效多重反應(yīng),可至30重多靶點(diǎn)擴(kuò)增;

  • 強(qiáng)耐受能力,可省略樣本核酸提取步驟,支持粗樣本直擴(kuò);

  • 適配體熱啟動(dòng)配方,快速啟動(dòng)功能并減小錯(cuò)誤率;

  • 可凍干形式,包含所有凍干所需輔料,更加便捷地滿足凍干需求。

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

#1101

Taq DNA Polymerase Hot-Start 

400/4000 U

#4000

PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix

100/500 Reactions

 

 

 


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